硫代乙酰胺(TAA)誘發(fā)肝衰竭模型

(1)復(fù)制方法  成年大鼠，硫代乙酰胺(TAA)經(jīng)腹腔注射250～350mg/kg體重，或經(jīng)皮下注射600mg/kg體重，或灌胃300～400mg/kg體重，24h后均分別以原先的劑量和同途徑再給藥1次。給藥后，連續(xù)觀察模型動(dòng)物的一般狀況，記錄其中毒死亡時(shí)間，同時(shí)可行顱骨電極包埋手術(shù)記錄不同時(shí)點(diǎn)的腦電圖，定時(shí)抽取血液作肝、腎功能測(cè)定，在模型動(dòng)物死亡或人為處死后，摘取其肝臟組織作病理檢查。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過程中，模型動(dòng)物均以10％葡萄糖生理鹽水作為惟一的飲用水，也可靜脈注射量的5％葡萄糖注射液，每日2次。

(2)模型特點(diǎn)  模型動(dòng)物在第二次給藥后8h起，出現(xiàn)尿黃，精神萎靡，對(duì)外周刺激反應(yīng)遲鈍或進(jìn)行性減弱，24h時(shí)，血清ALT、BT、TNF-a異常升高，隨后雖有逐步回落的趨勢(shì)，但72h內(nèi)一直維持在較高水平。此外，全血和血漿黏度增加，紅細(xì)胞壓積(HCT)提高、紅細(xì)胞聚集指數(shù)(EAI)上升，血清AST、BUN、λ-谷氨酰轉(zhuǎn)移酶(GGT)、脂蛋白-x(LP-x)、內(nèi)毒素(ET)含量提高，紅細(xì)胞剛性指數(shù)(IR)下降。病理檢查可見，模型動(dòng)物肝臟普遍充血腫大，呈暗紅色，表面有粗糙顆粒；光鏡示，肝臟大片壞死，肝細(xì)胞出現(xiàn)水腫和氣球樣變，匯管區(qū)有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，以中央靜脈為中心，肝小葉呈點(diǎn)狀和灶狀壞死。此時(shí)，模型動(dòng)物翻正反射消失，體顫等共濟(jì)失調(diào)表現(xiàn)明顯，并隨時(shí)間而逐步發(fā)展為嗜睡或昏迷狀，部分動(dòng)物出現(xiàn)死亡，死亡時(shí)間多發(fā)生在48h內(nèi)。死亡動(dòng)物口唇、尾部、足部等處有出血和淤點(diǎn)。此外，模型動(dòng)物腦電圖顯示有典型的肝性腦病三相波(δ波)出現(xiàn)。

(3)比較醫(yī)學(xué)  硫代乙酰胺(TAA)是一種肝毒性物質(zhì)，用其復(fù)制肝衰竭動(dòng)物模型，具有肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞受損和肝功能衰竭的典型特征，主要表現(xiàn)為：血清ALT、AST、ALP活性升高，肝細(xì)胞膜Na+－K+－ATP酶活性降低，血清TBIL、 BUN、ET含量上升，血漿凝血因子水平下降，PT延長(zhǎng)，全血和血漿黏度增加，血液和腦室內(nèi)NH3、AAA和氨基丁酸等神經(jīng)毒質(zhì)濃度提高，腦電頻率減慢，波幅增大，出現(xiàn)典型的三相波變化。TAA誘導(dǎo)肝衰竭的作用機(jī)制除直接損害肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞外，還可使肝巨噬細(xì)胞功能降低、腸源性內(nèi)毒素血癥形成，后者進(jìn)一步加重對(duì)肝組織的損害。有實(shí)驗(yàn)證明，不同劑量的TAA對(duì)模型動(dòng)物的肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞損傷和肝性腦病的嚴(yán)重程度呈顯著相關(guān)。TAA劑量越大，內(nèi)毒素和血氨水平越高，肝功能損害和肝臟病理變化越明顯，肝性腦病分級(jí)評(píng)分越高，存在明顯的量一效關(guān)系。如給大鼠腹腔注射TAA250mg/kg體重或350mg/kg體重，雖然兩種劑量均能導(dǎo)致100％動(dòng)物發(fā)生臨床型肝性腦病，但前者分級(jí)多為1～2級(jí)，無動(dòng)物死亡，而后者分級(jí)則多為3～4級(jí)，且動(dòng)物死亡率達(dá)41.7％。由于本模型方法簡(jiǎn)便，價(jià)格低廉，且與D-GLA肝衰竭所致急性肝功能衰竭動(dòng)物模型比，模型特征明確，病程相對(duì)緩慢，分期易于掌握，所以近年來受到了國(guó)內(nèi)外研究人員的較多重視和應(yīng)用。但是，本模型一般多局限于以小動(dòng)物為模型對(duì)象，所以其使用的廣泛性受到限制。